技術(shù)文章
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一、抗體的簡介抗體是一些淋巴細(xì)胞直接抵抗外來分子所產(chǎn)生的蛋白質(zhì),它們是免疫系統(tǒng)的重要組成成分,是實(shí)驗室的重要工具。抗體有兩個成員:多克隆抗體和單克隆抗體。多克隆抗體是用抗原注射動物產(chǎn)生的,針對相同蛋白質(zhì)的不同抗原決定簇直接產(chǎn)生的各種不同親和性的多種免疫球蛋白的混合物。單克隆抗體是在體外制備的,是免疫淋巴瘤細(xì)胞與分泌抗體的漿細(xì)胞融合后產(chǎn)生的,整個培養(yǎng)只產(chǎn)生一種抗體(常是IgG),直接抵抗外來物。二、抗體的作用抗體可以用放射性元素或者酶來標(biāo)記,可以讓它們所識別的蛋白質(zhì)變成可見的或...
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有趣又苦逼的實(shí)驗室日常(二)——細(xì)胞轉(zhuǎn)染專題1.質(zhì)粒的小船說翻就翻,轉(zhuǎn)染的巨輪說沉就沉,唯有實(shí)驗”狗”的信心屹立不倒。2.轉(zhuǎn)染十年功,準(zhǔn)備不足三分鐘;轉(zhuǎn)染十年功,細(xì)胞污染三分鐘;轉(zhuǎn)染十年功,質(zhì)粒不純?nèi)昼姡晦D(zhuǎn)染十年功,細(xì)胞不好三分鐘;轉(zhuǎn)染十年功,試劑不對三分鐘!3.好做就是好做,難做就是難做,你們說細(xì)胞轉(zhuǎn)染好難做是什么意思?4.做實(shí)驗的人換了一批又一批,只有我,雷打不動地做細(xì)胞轉(zhuǎn)染。5.優(yōu)質(zhì)質(zhì)粒是美術(shù),轉(zhuǎn)染效率高是技術(shù),熒光蛋白表達(dá)是藝術(shù),流式失敗是手術(shù)。6.至今轉(zhuǎn)染不成功的...
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有趣又苦逼的實(shí)驗室日常1.生活里80%的痛苦來源于做實(shí)驗,但是我知道,如果不做實(shí)驗,就會有100%的痛苦來源于沒法畢業(yè),所以在做實(shí)驗和畢業(yè)之間,我選擇做實(shí)驗。2.鐵打的身體,磁鐵打的架——磁力架。3.多年前你一句珍重,我至今沒瘦——USAScientific的八聯(lián)排。4.上了實(shí)驗的賊船,就做個快樂的海盜。5.早上剛一起床,就有一股做實(shí)驗的沖動。6.我跟你不熟,但你可以拿抗體來跟我套近乎。7.相愛沒有那么容易,每個人都有自己的實(shí)驗。8.不是我愛熬夜,而是黑夜需要我做實(shí)驗陪著它。...
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siRNA轉(zhuǎn)染1.siRNA導(dǎo)入細(xì)胞的方法siRNA導(dǎo)入細(xì)胞的方法有化學(xué)轉(zhuǎn)染技術(shù)、電穿孔法、磷酸鈣共沉淀技術(shù)、顯微注射和載體導(dǎo)入技術(shù)等。技術(shù)的選擇要考慮轉(zhuǎn)入時細(xì)胞的承受能力、細(xì)胞對病毒感染的敏感性、細(xì)胞生長特性等實(shí)驗條件的限制。對于貼壁細(xì)胞來講化學(xué)轉(zhuǎn)染技術(shù)比較合適,而對于懸浮細(xì)胞,電穿孔更有效。2.轉(zhuǎn)染試劑的選擇在選擇轉(zhuǎn)染試劑時,首先考慮的是特定的細(xì)胞株,而不是被導(dǎo)入細(xì)胞中的物質(zhì)。在試劑的選擇上建議選擇線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。3.篩選轉(zhuǎn)染試劑好的轉(zhuǎn)染試劑有以下特點(diǎn):如下表特性程度...
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有些實(shí)驗用到限制性內(nèi)切酶,有些實(shí)驗用到聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)這個技術(shù),有些實(shí)驗用到基因編輯技術(shù),而生命的藍(lán)圖,在CRISPR基因編輯技術(shù)的成功應(yīng)用后,變得更加美麗。一直向前走,越過活細(xì)胞全面基因編輯,越過個體全面基因編輯,回到線粒體基因組編輯,顯得滯后。線粒體,細(xì)胞的“能量工廠”,線粒體DNA的長度,剛好16569bp,擁有37個基因,編碼13種蛋白,它們參與了細(xì)胞的能量代謝。由于線粒體在能量穩(wěn)態(tài)中的重要作用,線粒體DNA中的點(diǎn)突變就可導(dǎo)致發(fā)育障礙、神經(jīng)肌肉疾病、癌癥進(jìn)展等等多種嚴(yán)重...
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