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細(xì)胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中最重要的組成部分,是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,主要為細(xì)胞提供必要的營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)因子和激素等70~100種不同化學(xué)成分,并調(diào)節(jié)培養(yǎng)物的pH值和滲透壓。血清是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個(gè)重要營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,可以為細(xì)胞提供基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、細(xì)胞增殖所需的生長(zhǎng)因子、促接觸和伸展因子、結(jié)合蛋白、激素和蛋白酶抑制劑等,因此在細(xì)胞培養(yǎng)基中常會(huì)添加血清。但血清存在很多問題,如:(1)動(dòng)物血清的成分復(fù)雜,雖然大部分成分已知,但仍然存在不清楚的成分;(2)動(dòng)物血清的成分及含量會(huì)因動(dòng)物性別...
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RNA提取試劑盒用于從細(xì)胞、組織、新鮮血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA,用LB10裂解樣品后,加入氯仿,溶液分為無(wú)色水相和粉紅色有機(jī)相,RNA在水相中;用RNA硅膠膜離心柱特異地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA),流出液中的smallRNA用miRNA硅膠膜離心柱特異地吸附。與其它miRNA提取方法相比,該試劑盒裂解能力強(qiáng)、提取量高、專一性強(qiáng),應(yīng)用范圍廣。RNA提取試劑盒其主要特征在于分離裝置中采用纖維素為固相載體,利用融...
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昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基為昆蟲細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化提供了重要保障。昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)基三個(gè)階段。隨著昆蟲桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)(BEVS)的廣泛應(yīng)用,以草地貪夜蛾細(xì)胞株Sf9和Sf21,以及粉紋夜蛾細(xì)胞株Tn5B1-4(商品名HighFive)為主的昆蟲細(xì)胞體外培養(yǎng)越來(lái)越受重視,昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基也越來(lái)越受到關(guān)注。目前應(yīng)用廣泛的商品化基礎(chǔ)培養(yǎng)基主要是Grace’s培養(yǎng)基、TC-100培養(yǎng)基和IPL-41培養(yǎng)基。現(xiàn)有的培養(yǎng)基是在分析昆蟲血淋巴的化學(xué)組...
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血清是生長(zhǎng)和附著因子、礦物質(zhì)、脂質(zhì)和激素的來(lái)源,是細(xì)胞培養(yǎng)的重要組分。血清能調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的通透性,同時(shí)能作為載體攜帶酶、脂質(zhì)、酶和微量元素等進(jìn)入細(xì)胞。血清質(zhì)量的好壞決定了細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。市面上的血清,有的有輻照處理,有的沒有,他們有什么區(qū)別嗎?實(shí)驗(yàn)使用的時(shí)候,如何選擇呢?國(guó)際上,對(duì)于藥品、食品、醫(yī)療的滅菌通常會(huì)采用輻照滅菌的方法,即利用電離輻射殺死微生物的方法。輻照血清,將正常血清經(jīng)過三次無(wú)菌過濾后,采用25KGy劑量的鈷-60γ射線照射所得到的血清,目的是去除血清中的微生物,...
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血清是生長(zhǎng)和附著因子、礦物質(zhì)、脂質(zhì)和激素的來(lái)源,是細(xì)胞培養(yǎng)的重要組分。血清能調(diào)節(jié)細(xì)胞膜的通透性,同時(shí)能作為載體攜帶酶、脂質(zhì)、酶和微量元素等進(jìn)入細(xì)胞。在使用的過程中,到底是選擇沒有滅活的血清?還是選擇熱滅活血清?有啥區(qū)別嗎?熱滅活可以破壞血清中補(bǔ)體的活性。哺乳動(dòng)物血清中存在的補(bǔ)體蛋白參與細(xì)胞的溶解,收縮平滑肌,刺激細(xì)胞和血小板釋放組胺,并激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。有研究比較了正常熱滅活胎牛血清對(duì)各種細(xì)胞株的生長(zhǎng)能力影響(如下圖所示),發(fā)現(xiàn)11株細(xì)胞中,熱滅活對(duì)6株細(xì)胞有負(fù)面影響(...
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